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?化學性質?
游離態:激發/發射波長493/636 nm;
結合DNA后:535/617 nm,熒光增強20-30倍12。
?分子式?:C??H??I?N?,?分子量?:668.4,CAS號:25535-16-425。
?外觀?:暗紅色結晶,溶于水(1 mg/mL)25。
?熒光特性?:
?作用機制?
通過嵌入DNA堿基對結合,無序列偏好性(每4-5個堿基對結合1個染料)25。
膜不通透性:僅穿透死細胞或凋亡晚期細胞的破損膜,標記細胞核12。
?細胞活性檢測?
與Calcein-AM、Hoechst等聯用,區分活/死細胞(活細胞拒染,死細胞紅染)23。
?流式細胞術?
用于細胞周期分析(G0/G1、S、G2/M期)及凋亡/壞死檢測25。
?熒光顯微鏡?
染色體或細胞核復染,兼容多重熒光標記(如抗體、mRNA原位雜交)25。
?溶液配制?
1.0 mg/mL水溶液,可直接稀釋至工作濃度(如1-50 μg/mL)13。
需避光保存(2-8℃或-20℃),有效期2年34。
?操作建議?
避免與含Tris或DTT的試劑混用(可能干擾熒光)2;
需RNase處理以消除RNA干擾25。
?染色步驟?:
?注意事項?:
細胞固定后,用PBS稀釋PI至終濃度10-50 μg/mL;
室溫避光孵育5-15分鐘23。
?毒性?:可能刺激皮膚/眼睛(GHS07/GHS08警告),操作時需戴手套7。
?降解產物?:高溫滅菌后生成乙醇和CO?,無致癌風險